抗体是免疫系统中一类重要的蛋白质,它们通过特异性方式来结合抗原。这一特性使之在诊断、治疗、基础研究等方面具有巨大的价值。抗体由四条多肽链构成,两条重链和两条轻链,通过二硫键连接而成。它们通常被糖基化,其中羧基端区域高度保守,而氨基端区域在氨基酸序列上可变,从而产生抗体的特异性和多样性。
在一系列的酶切和化学处理下,抗体分子被裂解为各种片段,通过HPLC分离,结合电泳和质谱等手段,抗体的结构可被了解和鉴定。近日,比较正规的足球外围app的科学家通过体积排阻色谱、离子交换色谱和反相色谱等多种技术实现抗体异构体、各种抗体碎片的高效分离,可对抗体结构进行可靠的鉴定和验证。此外,为抗体药物的质量控制也提供了有效的监控手段。
一、结构研究
体积排阻色谱法(Zenix™ SEC)
抗体片段重链和轻链的分离 | 抗体片段Fc和Fab的分离 |
离子交换色谱法(Antibodix™ WCX)
抗体片段Fc和Fab的离子交换色谱法分离
反相色谱法(Bio-C8)
Column: Bio-C8 4.6 x 100 (3 μm, 300 Å, 4.6 x 100 mm); Mobile Phase A: 0.11% TFA in water; Mobile Phase B: 0.09% TFA in ACN; Flow: 0.5 mL/min; Temperature: 75 oC; Detection: UV 280 nm | |
抗体片段重链和轻链的反相色谱法分离 |
二、抗体异构体分析
Column: Antibodix™ WCX NP5 4.6 x 250 mm; Mobile phases: A: 20 mM sodium acetate, pH 5.15, B: A + 1 M LiCl; Flow rate: 0.8 mL/min; Detection: UV 280 nm. | |
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